Darbo principas
Skirtingų tipų krešėjimo instrumentai naudoja skirtingus principus. Šiuo metu pagrindiniai aptikimo metodai yra koaguliacijos metodas, substrato chromogeninis metodas, imuninis metodas, latekso agliutinacijos metodas ir kt.
1. Krešėjimo metodas (biofizinis metodas)
Krešėjimo metodas – plazmoje aptikti fizikinių dydžių (šviesos, elektros, mechaninio judesio ir kt.) eilės pokyčius, veikiant krešėjimo aktyvikliui, o gautus duomenis analizuoti kompiuteriu ir paversti galutiniu rezultatu. , todėl jį galima pavadinti ir biologiniu fizikiniu dėsniu.
2. Substrato chromogeninis metodas (biocheminis metodas)
Substrato chromogeninis metodas – išmatuojant chromogeninio substrato absorbcijos pokytį daroma išvada apie tiriamos medžiagos kiekį ir aktyvumą, kuris taip pat gali būti vadinamas biocheminiu metodu. Principas yra dirbtinai susintetinti mažą peptidą, kuris turi panašią aminorūgščių seką į natūralius krešėjimo faktorius ir turi specifinę veikimo vietą bei jungia cheminį geną, kurį galima hidrolizuoti, kad susidarytų spalva, su aktyviosios vietos aminorūgštimi. Kadangi krešėjimo faktorius turi proteolitinio fermento aktyvumą, nustatymo metu jis gali veikti ne tik natūralią baltymo peptidinę grandinę, bet ir sintetinės peptidinės grandinės substratą, taip išskirdamas chromogeninį geną ir nuspalvindamas tirpalo spalvą. Išgaunamos spalvos atspalvis yra proporcingas krešėjimo faktoriaus aktyvumui, todėl galima tiksliai nustatyti kiekybinį įvertinimą. Šiuo metu yra daugybė sintetinių peptidų substratų, o dažniausiai naudojamas p-nitroanilinas (PNA), kuris yra geltonas ir gali būti matuojamas esant 405 mm bangos ilgiui.
3. Imunologiniai metodai
Taikant imunologinį metodą, išgryninta tiriamoji medžiaga naudojama kaip antigenas, paruošiamas atitinkamas antikūnas, o tada tiriamoji medžiaga kokybiškai ir kiekybiškai nustatoma pagal antigeno -antikūnų reakciją.
Vystymosi istorija
1910 m. Kottmanas išrado anksčiausią pasaulyje krešėjimo instrumentą, kuris atspindi plazmos krešėjimo laiką matuodamas klampos pokytį kraujo krešėjimo metu.
1922 m. Kugelmass naudojo drumstometrą, kad išmatuotų praleidžiamos šviesos pokyčius, kad atspindėtų plazmos krešėjimo laiką.
1950 m. Schnitgeris ir Grossas išrado koaguliacijos aparatą, pagrįstą elektro-galvaniniu metodu.
1960-aisiais buvo sukurti mechaniniai koaguliacijos instrumentai, atsirado ankstyvasis plokštuminio magnetinio karoliuko metodas.
Po 1970-ųjų, dėl mechanikos ir elektronikos pramonės plėtros, iš eilės atsirado įvairių tipų automatinio koaguliavimo prietaisai.
Devintajame dešimtmetyje dėl chromogeninių substratų atsiradimo ir jų taikymo nustatant kraujo krešėjimą, automatinis krešėjimo prietaisas gali atlikti ne tik bendruosius atrankos tyrimus, bet ir nustatyti pavienius krešėjimo, antikoaguliacijos, fibrinolizės sistemų veiksnius. Pasidaro įmanoma nustatyti antikoaguliaciją ir fibrinolizę.
Devintojo dešimtmečio pabaigoje išradus dvigubos magnetinės grandinės magnetinių granulių metodą, atsirado nauja trombų ir hemostazės nustatymo koncepcija. Dėl unikalaus dizaino principo šio tipo aptikimo prietaisuose kai kurių optinį aptikimą įtakojančių veiksnių nebėra.
Dešimtajame dešimtmetyje, kuriant automatinio krešėjimo instrumento imuninį kanalą, buvo integruoti įvairūs aptikimo metodai, o aptikimo elementai buvo išsamesni, todėl atsirado naujas trombų ir hemostazės nustatymo metodas.