Tiesioginis baltymų kiekybinis nustatymas iš spektrofotometrų (UV metodas)
Šis metodas yra tiesiogiai baltymų bandymas bangos ilgyje 280 nm. Pasirinkite Warburg formulę, fotometras gali tiesiogiai parodyti mėginio koncentraciją arba pasirinkti tinkamą konversijos metodą, kad absorbcijos vertė būtų konvertuojama į mėginio koncentraciją. Baltymų nustatymo procesas yra labai paprastas. Pirmiausia išbandykite tuščią, tada bandykite baltymą tiesiai. Dėl buferyje esančių tam tikrų priemaišų, 320 nm "fono" informacija paprastai pašalinama, o ši funkcija yra nustatyta "ON". Panašus į bandymo nukleino rūgštį, A280 absorbcijos vertė turi būti bent jau didesnė kaip 0,1 A, o optimali linijinė diapazonas yra nuo 1,0 iki 1,5. Kai eksperimento metu buvo naudojama Warburgo formulė, kad būtų rodoma mėginio koncentracija, buvo nustatyta, kad rodmuo "dreifuojamas". Tai normalus reiškinys. Iš tikrųjų tol, kol A280 absorbcijos vertės matymas neviršija 1%, rezultatas yra labai stabilus. Dreifo priežastis yra tai, kad Warburgo formulės optinio tankio vertė virsta koncentracija ir padauginama iš tam tikro faktoriaus. Jei absorbcijos vertė nedideli, absorbcijos vertė pasikeis, koncentracija bus sustiprinta, o rezultatas bus labai nestabilus. Tiesioginiai proteinų kiekio nustatymo metodai yra tinkami palyginti grynai, santykinai vienkomponenčių baltymų tyrimams. Tiesioginis UV kvantifikavimas yra greitesnis ir lengvesnis nei kolorimetrija; tačiau jis yra jautrus lygiagrečioms medžiagoms, pvz., DNR trikdžiams, ir dėl mažo jautrumo reikia didelės baltymų koncentracijos.
Įmonė specializuojasi spektrofotometrų pardavimo, pasveikinti klientus, kuriems reikia konsultuotis ir pirkti, mes suteiksime nuoširdų paslaugų ir kokybiškų produktų, taip pat mažesnes kainas.
El. Paštas: info@sumerlab.com
Interneto svetainė: sumerinstrument.com